美德声李斯特菌UVM2肉汤
产品概述
李斯特菌属细菌在自然界分布广泛,肉类、乳制品、水产制品及即食食品中均可能检出,是食品微生物检验的重要目标菌之一。李斯特菌UVM2肉汤属于两步增菌流程中的二次增菌培养基,按照Donnelly与Baigent以及McClain与Lee提出的配方制备,用于样品经UVM1肉汤一次增菌后的进一步富集,使受损或数量较少的目标菌恢复活力并增殖到可检出的水平。该培养基以牛肉浸粉、胰蛋白胨和酵母浸粉作为碳氮源与生长因子来源,并加入七叶苷;磷酸氢二钠与磷酸二氢钾构成缓冲体系,使培养基在细菌增殖过程中维持pH稳定。配方中的氯化钠用于维持渗透压,萘啶酸与盐酸吖啶黄作为选择性成分,可抑制部分革兰氏阳性杂菌,从而在混合菌群中为李斯特菌属细菌提供相对有利的增殖条件,便于后续在选择性琼脂上分离目标菌落。产品以脱水粉末形式提供,每升蒸馏水或去离子水加入54.4 g,加热至充分溶解后分装,于115 ℃高压灭菌15分钟,配制后pH为7.4±0.2(25 ℃)。制备后的培养基可接种经UVM1肉汤增菌的培养物,于30 ℃培养24小时,随后转接李斯特菌选择性琼脂平板,在37±1 ℃培养24-48小时并观察典型菌落,必要时结合标准生化方法完成鉴定。产品适用于食品微生物检验实验室、第三方检测机构以及科研单位的李斯特菌检测与研究工作,可满足肉类及其制品等样品的常规监测需求。
技术参数
✓产品编号:610045
✓产品名称:李斯特菌UVM2肉汤
✓产品类型:脱水培养基,李斯特菌属选择性增菌肉汤
✓典型配方(g/L):牛肉浸粉5.0;氯化钠20.0;磷酸氢二钠12.0;胰蛋白胨10.0;酵母浸粉5.0;磷酸二氢钾1.35;七叶苷1.0;萘啶酸0.02;盐酸吖啶黄0.025
✓配制浓度:每升蒸馏水或去离子水加入54.4 g粉末
✓配制后pH:7.4±0.2(25 ℃)
✓灭菌条件:115 ℃高压灭菌15分钟
✓增菌培养条件:一次增菌30 ℃培养24小时;二次增菌30 ℃培养24小时
✓选择性琼脂培养:37±1 ℃培养24-48小时
✓脱水培养基外观:自由流动、均匀,呈米色
✓制备后培养基外观:略带乳光并含细小沉淀,呈浅琥珀色至中等琥珀色
✓质控菌株:单核细胞增生李斯特菌ATCC 19111、ATCC 13932生长良好;金黄色葡萄球菌ATCC 25923不生长
使用方法
✓称取54.4 g粉末,加入1 L蒸馏水或去离子水中,搅拌混匀。
✓加热并持续搅拌,直至粉末充分溶解。
✓将溶解后的培养基分装至所需容器中。
✓于115 ℃高压灭菌15分钟,冷却后备用。
✓取25 g或25 ml样品加入225 ml李斯特菌UVM1肉汤中,均质2分钟,于30 ℃培养24小时。
✓取0.1 ml UVM1培养物转接至10 ml李斯特菌UVM2肉汤中,于30 ℃培养24小时完成二次增菌。
✓取二次增菌液0.2 ml划线接种李斯特菌选择性琼脂平板;另取1 ml加入4.5 ml无菌氢氧化钾溶液(2.5 g氢氧化钾与20 g氯化钠溶于1000 ml蒸馏水,pH高于12)中混匀1分钟,同样划线接种。
✓将选择性琼脂平板置于37±1 ℃培养24-48小时,观察典型菌落,并按标准生化方法进行鉴定。