美德声亚硫酸铋琼脂培养基
产品概述
亚硫酸铋琼脂是一种用于沙门氏菌属选择性分离的固体培养基，尤其适用于伤寒沙门氏菌的分离，可应用于食品、动物饲料和环境样品的微生物检验。该培养基依据ISO 6579-1的推荐配制，并符合FDA/BAM配方要求，在沙门氏菌检测流程中作为选择性分离平板使用，用于从混合菌群样品中获得目标菌的分离菌落。
方法原理
酶消化动物组织与肉浸出物为微生物生长提供氨基酸、氮源、碳源、维生素和矿物质；葡萄糖（右旋糖）是可发酵碳水化合物；磷酸氢二钠作为缓冲剂维持培养基的酸碱环境；硫酸亚铁是硫化氢产生的指示剂；亚硫酸铋与亮绿组成选择性体系，对沙门氏菌属和部分志贺氏菌属以外的革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌具有抑制作用；琼脂为凝固剂，使培养基保持固体状态，便于划线分离。
菌落特征
在亚硫酸铋琼脂上，典型的伤寒沙门氏菌菌落为黑色，周围环绕黑色或棕黑色晕圈，晕圈大小可达菌落的数倍；在反射光下（以日光观察为宜），该晕圈呈现明显的金属光泽。其他沙门氏菌菌株形成黑色至绿色菌落，周围培养基变暗不明显。多数志贺氏菌属受到抑制，但福氏志贺氏菌和宋内氏志贺氏菌的某些菌株可在该培养基上生长，形成棕至绿色、中心凹陷呈火山口状的隆起菌落。划线时应争取获得分离良好的单个菌落，因为在生长密集区域，伤寒沙门氏菌呈浅绿色，容易被误判为阴性。
产品特点
✓ 依据ISO 6579-1推荐配制，并符合FDA/BAM配方要求，可用于食品链沙门氏菌检测的选择性分离步骤
✓ 对沙门氏菌属具有选择性，尤其适用于伤寒沙门氏菌的分离，同时抑制多数非目标革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌
✓ 硫酸亚铁作为硫化氢产生指示剂，典型菌落呈黑色并伴黑色或棕黑色晕圈，反射光下可见金属光泽
✓ 亚硫酸铋与亮绿构成选择性体系，有助于在混合菌群样品中实现目标菌的分离
✓ 磷酸氢二钠缓冲体系与葡萄糖碳源配合，为菌体生长提供缓冲环境与可利用碳源
✓ 脱水培养基呈自由流动、均匀的浅米色至浅绿色粉末；溶解后培养基不透明，呈浅灰绿至中绿色，可能含絮状沉淀
✓ 提供脱水培养基和90 mm即用平板两种形式，即用平板可直接用于划线接种
✓ 采用标准菌株进行培养验证，具体结果可查阅批次相关的分析证书（CoA）
技术参数
✓ 产品类型：沙门氏菌属选择性分离固体培养基，提供脱水培养基与90 mm即用平板
✓ 适用标准：ISO 6579-1；符合FDA/BAM配方
✓ 目标菌：沙门氏菌属，尤其伤寒沙门氏菌
✓ 终pH：7.7±0.2（25°C）
✓ 溶解用量：52 g粉末悬浮于1 L蒸馏水或去离子水
✓ 灭菌方式：加热煮沸并频繁振摇至充分溶解，不得高压灭菌；冷却至45-50°C后倾注平板
✓ 培养条件：需氧培养，37°C，24-48小时
✓ 有效期：脱水培养基1年；90 mm即用平板3个月
✓ 平板使用时限：平板应于划线前制备并避光保存，48小时内选择性下降
✓ 脱水培养基外观：自由流动、均匀，浅米色至浅绿色
✓ 制备后培养基外观：不透明，可能含絮状沉淀，浅灰绿至中绿色
典型配方（g/L）
✓ 酶消化动物组织：10.0 g/L
✓ 肉浸出物：5.0 g/L
✓ 葡萄糖：5.0 g/L
✓ 磷酸氢二钠（无水）：4.0 g/L
✓ 硫酸亚铁（无水）：0.3 g/L
✓ 亚硫酸铋：8.0 g/L
✓ 亮绿：0.025 g/L
✓ 琼脂：20.0 g/L
✓ 终pH：7.7±0.2（25°C）
✓ 配方可根据性能规格要求进行调整和/或补充
适用场景
✓ 食品微生物检验：用于食品样品中沙门氏菌属的选择性分离
✓ 动物饲料检测：用于饲料样品中沙门氏菌属的分离培养
✓ 环境样品检测：用于环境来源样品中沙门氏菌属的分离
✓ 食品链微生物检测实验室、第三方检测机构及相关部门实验室的常规沙门氏菌检测流程
✓ 作为ISO 6579-1检测流程中与XLD平板配合使用的第二选择性分离平板
✓ 开展沙门氏菌分离与生化、血清学确认试验的微生物实验室
使用方法
✓ 培养基制备：将52 g粉末悬浮于1 L蒸馏水或去离子水中，充分混匀，加热煮沸并频繁振摇至充分溶解；不得高压灭菌；冷却至45-50°C后倾注平皿
✓ 平板准备：在划线前制备平板，并置于避光条件保存；平板的选择性在48小时内下降
✓ 前增菌：取25 g样品与225 ml缓冲蛋白胨水（BPW，货号24099）混合，于34-38°C培养18小时
✓ 选择性增菌：用前增菌培养物接种RVS肉汤（货号24400）或MSRV琼脂（货号26478），以及MKTTn肉汤（货号20072）；RVS肉汤或MSRV琼脂于41.5°C培养24小时，MKTTn肉汤于37°C培养24小时
✓ 分离：从选择性增菌培养物划线接种XLD平板（货号10056）表面，以获得分离良好的菌落；以同样方式接种第二选择性平板，如亚硫酸铋琼脂；需氧条件下37°C培养24-48小时
✓ 确认：结合生化试验与血清学试验结果，判断分离株是否属于沙门氏菌属
✓ 观察提示：亚硫酸铋琼脂应培养共48小时，以使所有伤寒型菌株生长；划线时应争取获得分离良好的菌落，在生长密集区域伤寒沙门氏菌呈浅绿色，可能被误判为阴性
注意事项
✓ 不得使用超过标签标示有效期的产品，产品出现污染迹象或任何变质迹象时不得使用
✓ 本产品供专业人员使用，操作人员应经过培训并具备相应的实验室方法经验
✓ 使用前应仔细阅读使用说明；操作偏离说明时，检测结果的可靠性无法得到保证
✓ 有关危害信息与安全操作规范，请查阅安全数据表（SDS）
✓ 废弃物处置应按照当地和区域现行法规要求执行
美德声亚硫酸铋琼脂培养基