美德声乙酰胺肉汤
产品概述
乙酰胺肉汤是一种液体培养基,用于以膜过滤技术对水样中的铜绿假单胞菌进行确认。该培养基符合ISO 16266的要求,适用于本底菌群较低的水样检测,例如供人消费的水以及泳池水。在水质微生物检验流程中,膜过滤分离得到的疑似菌落需要经过生化确认,乙酰胺肉汤即为该确认环节使用的液体培养基之一。
从方法原理上看,培养基中的磷酸钾起缓冲作用,硫酸镁、钼酸钠和硫酸铁是为微生物生长提供支持的无机盐,乙酰胺是培养基中提供碳源的成分,氯化钠用于维持培养基的渗透压平衡。革兰氏阴性非发酵菌可将乙酰胺脱氨,产生氨,从而在加入显色试剂后表现出可判读的颜色变化,这一代谢特征构成了乙酰胺肉汤用于确认目标菌的基础。
在结果判读方面,将培养后的肉汤加入1-2滴Nessler试剂,出现黄色至砖红色表明产生氨,为阳性反应;没有颜色变化则为阴性反应。该培养基主要用于确认产荧光但不产绿脓菌素的菌落以及呈红褐色色素的菌落,必要时还可结合氧化酶试验、King's B培养基等其他确认试验共同判断。产品有管装即用型和脱水培养基两种形式,可依据实验室的检测通量与操作习惯选择。
技术参数
✓ 产品名称:乙酰胺肉汤
✓ 培养基类型:液体培养基
✓ 检测目标:铜绿假单胞菌
✓ 依据标准:ISO 16266
✓ 终pH值:7.0±0.5(25°C)
✓ 脱水培养基外观:自由流动、均匀,白色至浅米色粉末
✓ 制备后培养基外观:无色、澄清溶液
✓ 有效期:脱水培养基4年;管装培养基1年
✓ 包装规格:20×5ml(20×100mm试管)、100×5ml(16×100mm塑料管)、500g脱水培养基
典型配方
每升纯化水中的含量:
✓ 磷酸二氢钾 1.0 g/l
✓ 硫酸镁(无水)0.2 g/l
✓ 乙酰胺 2.0 g/l
✓ 氯化钠 0.2 g/l
✓ 钼酸钠 0.005 g/l
✓ 硫酸铁(七水)0.0005 g/l
✓ 终pH 7.0±0.5(25°C)
配方可根据性能规格要求进行调整和/或补充;以上为每升纯化水的克数。
质量控制
预期培养反应(质控菌株接种量≤100 CFU,培养条件20-24h/36±2°C):
✓ 铜绿假单胞菌 ATCC 27853:生长良好,乙酰胺试验阳性
✓ 铜绿假单胞菌 ATCC 10145:生长良好,乙酰胺试验阳性
✓ 铜绿假单胞菌 ATCC 9027:生长良好,乙酰胺试验阳性
✓ 大肠埃希菌 ATCC 25922:不生长,乙酰胺试验阴性
预期培养反应请以实际批次对应的检验证书(CoA)为准。
适用场景
✓ 供人消费的水、泳池水等本底菌群较低水样的铜绿假单胞菌检测,按ISO 16266开展膜过滤法检验
✓ 自来水厂、水质监测机构、第三方检测实验室及疾病预防控制机构的水质微生物检验室
✓ 膜过滤分离后疑似铜绿假单胞菌菌落的确认试验,用于补充平板分离结果的判断
✓ 产荧光但不产绿脓菌素菌落以及呈红褐色色素菌落的确认,与氧化酶试验、King's B培养基等方法配合使用
✓ 需要建立水质微生物检测流程并开展培养基质量控制记录的实验室日常检测工作
使用方法
脱水培养基配制:
✓ 将3.4g粉末悬浮于1L蒸馏水或去离子水中,充分混匀
✓ 加热并频繁振摇,煮沸至粉末充分溶解
✓ 将溶解后的培养基分装至试管或其他终容器中
✓ 在121°C条件下高压灭菌15分钟,冷却后备用
检测流程:
✓ 将稀释或未稀释的水样通过0.45µm无菌滤膜过滤
✓ 将每张滤膜置于Pseudomonas CN琼脂平板上,于36±2°C培养40-48小时
✓ 计数产生蓝/绿色(绿脓菌素)的菌落,确认为铜绿假单胞菌
✓ 对产荧光但不产绿脓菌素的菌落及红褐色色素菌落进行确认:转接至营养琼脂,于36±2°C培养20-24小时
✓ 用亚培养物接种一支乙酰胺肉汤管,于36±2°C培养20-24小时
✓ 加入1-2滴Nessler试剂,观察是否产生氨:出现黄色至砖红色为阳性,无颜色变化为阴性
产品清单
| 型号 | 产品名称 | 规格 |
|---|
| 24154 | 乙酰胺肉汤 | 20×5ml(20×100mm试管) |
| 26154P | 乙酰胺肉汤 | 100×5ml(16×100mm塑料管) |
| 610392 | 乙酰胺肉汤 | 500g(脱水培养基) |