微生物脱水培养基及添加剂
美德声李斯特菌弗雷泽肉汤II美德声李斯特菌弗雷泽肉汤II

美德声李斯特菌弗雷泽肉汤II

产品概述

李斯特菌弗雷泽肉汤II是一种选择性液体培养基,需配合专用添加剂使用,用于食品、动物饲料以及食品生产与加工环境样品中单核细胞增生李斯特菌和李斯特菌属的选择性增菌。产品依据ISO 11290-1的推荐设计,货号为610618,以脱水粉末形式提供,规格为500 g塑料瓶装。

培养基的基础成分包括动物组织酶消化物、酪蛋白酶消化物、肉提取物和酵母提取物,为微生物生长提供氮源、维生素、矿物质与氨基酸,其中酵母提取物是B族维生素的重要来源。氯化钠维持培养基的渗透压,其较高浓度有助于抑制肠球菌;磷酸氢二钠与磷酸二氢钾构成缓冲体系,使成品在25°C下的pH保持在7.2±0.2。培养基中的七叶苷可被李斯特菌属各菌种水解为七叶苷原,与柠檬酸铁铵提供的铁离子反应后使培养基变黑,形成便于观察的生长指示;氯化锂对伴随菌群具有抑制作用,吖啶黄与萘啶酸作为选择性添加剂进一步提高选择性。产品需在加入李斯特菌弗雷泽添加剂(货号81628A)后成为完整培养基。在ISO方法中,半弗雷泽肉汤用于一次增菌,弗雷泽肉汤用于二次增菌,前者为后者的改良配方,萘啶酸与吖啶黄的浓度减半。

产品特点

✓ 依据ISO 11290-1方法设计,用于食品链中单核细胞增生李斯特菌及李斯特菌属的检测流程

✓ 采用七叶苷与柠檬酸铁铵显色体系,李斯特菌生长时可引起培养基变黑,便于肉眼观察

✓ 含氯化锂、盐酸吖啶黄与萘啶酸等多种选择性成分,可抑制样品中的伴随菌群

✓ 氯化钠含量为20.0 g/L,较高的盐浓度有助于抑制肠球菌等杂菌的生长

✓ 磷酸盐缓冲体系使成品pH维持在25°C下7.2±0.2,符合ISO 11290-1的推荐

✓ 脱水粉末剂型,500 g塑料瓶包装,可按一次增菌或二次增菌的需要加入不同数量的添加剂

✓ 可与O.A.李斯特菌琼脂、李斯特菌帕尔卡姆琼脂、李斯特菌牛津琼脂等配套使用,完成后续分离与初步鉴定

技术参数

✓ 产品名称:李斯特菌弗雷泽肉汤II

✓ 产品编号:610618

✓ 剂型:脱水培养基(粉末)

✓ 包装规格:500 g粉末,塑料瓶装

✓ 成品pH:25°C下7.2±0.2

✓ 有效期:4年

✓ 粉末外观:自由流动、均匀,米色

✓ 即用型培养基外观:澄清,琥珀色

✓ 配套添加剂:李斯特菌弗雷泽添加剂,货号81628A

✓ 适用标准:ISO 11290-1

✓ 质控(生长率):单核细胞增生李斯特菌血清型4b(WDCM 00021)、大肠埃希菌(WDCM 00013)、粪肠球菌(WDCM 00009);37±1°C培养24±2 h,培养基变黑,O.A.李斯特菌琼脂上菌落数>10

✓ 质控(选择性):大肠埃希菌(WDCM 00013)在胰酪大豆胨琼脂上受到抑制;粪肠球菌(WDCM 00009)在胰酪大豆胨琼脂上的菌落数参见相应技术资料

适用场景

✓ 食品生产企业对原料、半成品与成品中李斯特菌的常规监测与选择性增菌

✓ 食品加工车间、生产设备及环境表面样品的李斯特菌污染调查

✓ 动物饲料及饲料原料的微生物检验与卫生监控

✓ 第三方检测机构与食品安全检验实验室依据ISO 11290-1开展的单核细胞增生李斯特菌检测

✓ 需要从复杂基质中富集李斯特菌,以便后续在选择性琼脂上分离菌落的检测流程

使用方法

✓ 将55 g粉末悬浮于1 L去离子水或蒸馏水中

✓ 加热至沸腾并振荡,直至粉末充分溶解

✓ 于121°C高压灭菌15分钟

✓ 冷却至45-50°C

✓ 无菌操作加入复水后的添加剂:一次增菌(半弗雷泽肉汤)加入2瓶李斯特菌弗雷泽添加剂和1瓶弗雷泽萘啶酸–吖啶黄添加剂;二次增菌(弗雷泽肉汤)加入2瓶李斯特菌弗雷泽添加剂和2瓶弗雷泽萘啶酸–吖啶黄添加剂

✓ 将样品加入半弗雷泽肉汤制备成10倍稀释(w/v或v/v),于30±1°C培养25±1 h

✓ 取0.1 ml一次增菌培养物转接至10 ml弗雷泽肉汤,于37±1°C培养24±2 h

✓ 从一次与二次增菌液中划线接种O.A.李斯特菌琼脂(货号10620),于37±1°C培养24±2 h,并继续培养24±2 h观察结果

✓ 使用选择性增菌液接种第二种选择性培养基,如李斯特菌帕尔卡姆琼脂(货号10041)、李斯特菌牛津琼脂(货号610167),具体操作参见相应技术资料

结果判读

✓ 半弗雷泽肉汤在培养过程中可能出现变黑

✓ O.A.李斯特菌琼脂上的蓝绿色菌落(有或无晕圈)视为疑似李斯特菌属;单核细胞增生李斯特菌的典型菌落周围具有不透明晕圈

✓ 确证时转接至适宜的非选择性琼脂,如血琼脂、营养琼脂、胰酪大豆胨酵母浸膏琼脂(货号10432),并进行包含阳性与阴性对照的确认试验

产品清单

型号产品名称规格
610618李斯特菌弗雷泽肉汤II500 g粉末,塑料瓶装

美德声李斯特菌弗雷泽肉汤II

✓ 依据ISO 11290-1方法设计,适用于食品链中单核细胞增生李斯特菌及李斯特菌属的检测流程

✓ 采用七叶苷与柠檬酸铁铵显色体系,李斯特菌生长时可引起培养基变黑,便于肉眼观察判读

✓ 含氯化锂、盐酸吖啶黄与萘啶酸等多种选择性成分,可抑制样品中的伴随菌群

✓ 氯化钠含量为20.0 g/L,较高的盐浓度有助于抑制肠球菌等杂菌的生长

✓ 磷酸盐缓冲体系使成品pH在25°C下稳定维持7.2±0.2,符合ISO 11290-1的推荐

✓ 脱水粉末剂型,500 g塑料瓶包装,可按一次增菌或二次增菌的需要加入不同数量的添加剂

美德声李斯特菌弗雷泽肉汤II

✓ 食品生产企业对原料、半成品与成品中李斯特菌的常规监测与选择性增菌

✓ 食品加工车间、生产设备及环境表面样品的李斯特菌污染调查

✓ 动物饲料及饲料原料的微生物检验与卫生监控

✓ 第三方检测机构与食品安全检验实验室依据ISO 11290-1开展的单核细胞增生李斯特菌检测

✓ 需要从复杂基质中富集李斯特菌,以便后续在选择性琼脂上分离菌落的检测流程

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