美德声亚硫酸铁琼脂培养基
产品概述
亚硫酸铁琼脂是一种用于亚硫酸盐还原梭菌检测与计数的微生物培养基，依据 ISO 15213-1 标准设计，适用于食品、动物饲料以及食品生产与处理环节的环境样品检验。该培养基通过菌落计数技术对样品中的目标微生物进行观察与计数，是食品微生物实验室开展梭菌检测常用的基础培养基之一，可配合倾注平板法与膜过滤技术使用。
指示原理
培养基中的酪蛋白酶消化物与大豆酶消化物为微生物生长提供氨基酸、氮源、碳源、维生素和矿物质，酵母浸膏是 B 族维生素的丰富来源。柠檬酸铁铵与焦亚硫酸钠共同构成硫化氢指示体系，琼脂作为凝固剂。梭菌将亚硫酸盐还原为硫化物，硫化物与铁离子反应生成黑色硫化铁沉淀，使阳性菌落呈现黑色，便于识别与计数。
产品形式
✓ 脱水培养基：需按 41.5 g/L 的比例复溶并经 121°C 高压灭菌 15 分钟
✓ 瓶装培养基：水浴融化后即可倾注
✓ 60 mm 即用平板：可配合膜过滤技术接种
按照标准流程操作，可覆盖从样品接种、厌氧培养到菌落判读与确认的完整过程。
技术参数
✓ 产品类型：选择性鉴别琼脂培养基（亚硫酸铁琼脂），用于亚硫酸盐还原梭菌的检测与计数
✓ 适用标准：ISO 15213-1
✓ 培养基 pH：7.6±0.2（25°C）
✓ 复溶浓度：41.5 g 粉末溶于 1 L 蒸馏水或去离子水
✓ 灭菌条件：121°C 高压灭菌 15 分钟
✓ 倾注温度：平板倾注 44-47°C；瓶装培养基融化后冷却至 45-50°C 倾注
✓ 平板用量：90 mm 平板 12-15 ml 培养基加 5 ml 覆盖层；140 mm 平板 45-50 ml 培养基加 10 ml 覆盖层
✓ 培养条件：37±1°C，厌氧环境，48±2 小时
✓ 芽孢计数处理：仅计数芽孢时，将十倍稀释系列于 80°C 水浴加热 10±1 分钟
✓ 有效期：脱水培养基 4 年；瓶装培养基 1 年；即用平板 4 个月
✓ 外观：脱水培养基为自由流动、均匀、米色；配制后培养基为微乳光、浅琥珀色
✓ 包装规格：脱水培养基 100 g 与 500 g；瓶装 6×100 ml；60 mm 平板 20 块
✓ 产品货号：611401（500 g）、621401（100 g）、403180（6×100 ml）、163372（20 块 60 mm 平板）
质量控制
采用标准菌株验证，生产力比值（PR）0.5 相当于 50% 的回收率，具体数据请参阅实际批次的检验报告（CoA）。
✓ 产气荚膜梭菌 WDCM 00007（ATCC 13124；NCTC 8237）：接种量 50-100 CFU，48±2 h/37±1°C 厌氧环境培养，生长良好，菌落黑色（TSA 上 PR≥0.5）
✓ 大肠埃希氏菌 WDCM 00012（ATCC 8739；NCTC 12923）：接种量 10³-10⁴ CFU，48±2 h/37±1°C 厌氧环境培养，生长弱至良好，菌落无变黑
典型配方
成分含量（g/L 纯化水）：
✓ 酪蛋白酶消化物 15.0
✓ 大豆酶消化物 5.0
✓ 酵母浸膏 5.0
✓ 无水焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）0.5
✓ 柠檬酸铁铵 1.0
✓ 琼脂 15.0
✓ pH（25°C）7.6±0.2
配方可按满足性能规范的要求进行调整或补充。
适用场景
✓ 食品生产企业实验室对原料、半成品及成品中亚硫酸盐还原梭菌进行计数检测
✓ 动物饲料及饲料原料的微生物学检验
✓ 食品生产与处理场所的环境样品监控，如加工区域表面与环境卫生样品
✓ 第三方检测机构与监管部门依据 ISO 15213-1 开展的标准方法检测
✓ 需要对芽孢进行计数时，对稀释系列进行 80°C 热处理后接种的检测流程
✓ 采用膜过滤技术处理样品的实验室检测工作
使用方法
✓ 脱水培养基复溶：称取 41.5 g 粉末加入 1 L 蒸馏水或去离子水中，加热并频繁振摇至充分溶解
✓ 灭菌：于 121°C 高压灭菌 15 分钟
✓ 瓶装培养基处理：将瓶内培养基置于 100°C 水浴中融化（瓶盖部分松开），融化后拧紧瓶盖，翻转瓶子检查培养基是否均匀；冷却至 45-50°C，混匀并避免产生泡沫后倾注
✓ 接种：按 ISO 15213-1 采用倾注平板法，转移 1 ml 测试样品或 1 ml 初始悬液至双份平板中，向每个平板倾注融化并保温于 44-47°C 的培养基（90 mm 平板 12-15 ml，140 mm 平板 45-50 ml），小心将接种物与培养基混匀；对后续稀释度重复该操作
✓ 覆盖层：待琼脂凝固后，再倾注亚硫酸铁琼脂培养基作为覆盖层（90 mm 平板 5 ml，140 mm 平板 10 ml）
✓ 芽孢计数：若检测范围仅为芽孢，将十倍稀释系列置于 80°C 水浴中加热 10±1 分钟
✓ 即用平板接种：使用 60 mm 即用平板时，采用膜过滤技术接种培养基
✓ 培养：将接种后的平板置于 37±1°C、厌氧环境中培养 48±2 小时
✓ 结果判读：所有黑色或灰色至黄棕色的菌落计为推定亚硫酸盐还原梭菌
✓ 确认：将可疑菌落转接至两块非选择性血琼脂平板（如哥伦比亚血琼脂）或其他营养丰富培养基（如胰酪大豆胨琼脂或脑心浸液琼脂）；每对平板中一块需氧培养、另一块厌氧培养，于 37°C 培养 20±2 小时，仅在厌氧平板中生长的菌落属于梭菌属
✓ 结果报告：未进行确认时，结果可报告为“厌氧亚硫酸盐还原细菌”
产品清单
| 型号 | 产品名称 | 规格 |
|---|
| 163372 | 亚硫酸铁琼脂（ISO 15213-1） | 60 mm 琼脂平板，20 块/包 |
| 403180 | 亚硫酸铁琼脂（ISO 15213-1） | 瓶装，6×100 ml |
| 621401 | 亚硫酸铁琼脂（ISO 15213-1） | 脱水培养基，100 g |
| 611401 | 亚硫酸铁琼脂（ISO 15213-1） | 脱水培养基，500 g |
美德声亚硫酸铁琼脂培养基