美德声哥伦比亚琼脂基础
产品概述
哥伦比亚琼脂基础是一种脱水基础培养基，适用于从临床样本中分离苛养微生物。其典型配方（每升）由特殊蛋白胨23.0g、淀粉1.0g、氯化钠5.0g和琼脂14.0g组成，25℃下终pH为7.3±0.2。该配方为营养要求较高的细菌提供生长所需的营养基础，并可与血液等添加成分配合使用。
使用时，将43.0g粉末悬浮于1L蒸馏水或去离子水中，加热至沸腾使粉末充分溶解，经121℃高压灭菌15分钟后冷却至45-50℃，再无菌加入5%脱纤维无菌羊血并混匀，分装至培养皿中即制成血琼脂平板。该平板适用于链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌以及李斯特菌等苛养微生物的分离与生长。接种后可在需氧、厌氧或5-10%二氧化碳条件下于36±1℃培养18-48小时，随后检查平板上的生长情况与溶血反应。
血琼脂平板上的溶血类型包括：
✓ α溶血：菌落周围血红蛋白被还原为高铁血红蛋白，培养基呈绿色
✓ β溶血：红细胞被溶解，菌落周围形成透明带
✓ γ溶血：红细胞未被破坏且培养基颜色无变化
✓ 部分溶解型溶血
技术参数
✓ 产品类型：脱水基础培养基（粉末）
✓ 终pH值（25℃）：7.3±0.2
✓ 典型配方（每升）：特殊蛋白胨23.0g；淀粉1.0g；氯化钠5.0g；琼脂14.0g
✓ 配制用量：43.0g粉末悬浮于1L蒸馏水或去离子水
✓ 灭菌条件：121℃高压灭菌15分钟
✓ 血液添加：冷却至45-50℃后无菌加入5%脱纤维无菌羊血
✓ 培养条件：36±1℃，18-48小时；需氧、厌氧或5-10%CO2
✓ 脱水培养基外观：自由流动、均匀；米色
✓ 制备后培养基外观：不透明；樱桃红色
质控菌株与结果：
✓ 化脓性链球菌ATCC19615：生长良好，β溶血
✓ 肺炎链球菌ATCC6303：生长良好，α溶血
✓ 金黄色葡萄球菌ATCC25923：生长良好，β溶血
✓ 阴道加德纳菌ATCC14018：生长良好，β溶血
适用场景
✓ 临床微生物实验室对痰液、脓液、分泌物等临床样本中的苛养菌进行分离培养
✓ 链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌及李斯特菌等微生物的分离与生长观察
✓ 血琼脂平板上α溶血、β溶血、γ溶血等溶血反应类型的观察与记录
✓ 以CNA补充剂或阴道加德纳菌补充剂强化的选择性分离培养
✓ 在需氧、厌氧或5-10%二氧化碳环境下开展的细菌培养工作
使用方法
✓ 取43.0g粉末，悬浮于1L蒸馏水或去离子水中
✓ 加热至沸腾，直至粉末溶解
✓ 于121℃高压灭菌15分钟
✓ 冷却至45-50℃，无菌加入5%脱纤维无菌羊血并混匀
✓ 分装至培养皿中，制成平板
✓ 用无菌接种环划线接种标本，于36±1℃培养18-48小时，可采用需氧、厌氧或5-10%CO2条件
✓ 观察平板上的生长情况与溶血反应
注意事项
✓ 配制时使用蒸馏水或去离子水，并将培养基加热至沸腾，使粉末溶解后再进行高压灭菌
✓ 脱纤维无菌羊血应在培养基冷却至45-50℃后无菌加入，并混合均匀
✓ 接种与培养应按照实验室既定规程操作，培养结束后检查平板的生长情况及溶血反应
✓ 如需强化为CNA（葡萄球菌/链球菌）培养基，可加入2瓶CNA补充剂（货号81048），每瓶用5ml无菌蒸馏水复溶，培养基中硫酸黏菌素为10mg/l、萘啶酸为16mg/l
✓ 如需强化为阴道加德纳菌培养基，可加入2瓶阴道加德纳菌补充剂（货号81040），每瓶用5ml乙醇与无菌蒸馏水按1:1配制的溶液复溶，培养基中庆大霉素为6mg/l、两性霉素B为2mg/l、萘啶酸为30mg/l
美德声哥伦比亚琼脂基础