美德声克里斯滕森尿素琼脂基础
产品概述
克里斯滕森尿素琼脂基础是一种用于微生物尿素酶活性检测的鉴别培养基，适用于临床标本及其他样品中尿素分解菌的鉴定。该培养基符合ISO 6579-1、ISO 10273、ISO 19250、ISO 21567及ISO 11133标准的相关要求，可作为诊断的辅助手段，确诊还需结合其他试验完成。培养基以斜面形式使用，通过颜色变化判读尿素酶活性，便于在常规生化鉴定流程中衔接使用。
检测原理
蛋白胨为微生物生长提供氮源、碳源和氨基酸，葡萄糖作为能源物质，氯化钠维持培养基的渗透压平衡，磷酸二氢钾起缓冲作用，酚红为pH指示剂，琼脂为凝固剂，尿素则作为尿素酶的底物。
产尿素酶的微生物将尿素水解为氨和二氧化碳，氨的释放使培养基pH升高并向碱性方向移动，酚红指示剂随之由黄色或橙色转为粉红色或红色，从而指示阳性反应。
在反应速度方面，变形杆菌属通常在斜面上6小时内出现阳性反应，在全培养基中可延长至24小时，而其他尿素酶阳性细菌反应较慢。典型沙门氏菌培养物不水解尿素，培养基颜色保持不变；部分致病性肠炎耶尔森菌菌株可能需要长达7天才能出现阳性反应。
因此该培养基常用于区分变形杆菌属与克雷伯菌属、肠杆菌属等产尿素酶较弱的菌属，并作为沙门氏菌、志贺氏菌等检测流程中的鉴别环节。
产品特点
✓ 以酚红作为pH指示剂，尿素酶阳性反应由黄色或橙色转为粉红色或红色，颜色判读直观，便于实验室常规观察
✓ 配方中含有尿素作为酶促底物，可区分尿素分解菌与非分解菌，典型沙门氏菌不水解尿素，培养基颜色保持不变
✓ 变形杆菌属反应迅速，在斜面上数小时即可显色，便于与克雷伯菌属、肠杆菌属等产尿素酶较弱的菌属相区分
✓ 基础培养基终pH为6.8±0.2，配方中磷酸二氢钾提供缓冲能力，有助于在反应过程中维持体系环境稳定
✓ 提供脱水培养基、瓶装培养基以及尿素40%补充液等形式，实验室可根据自身工作量与配制条件选择
✓ 基础培养基与尿素补充液分开保存、临用前无菌混合，避免尿素在高温灭菌过程中分解，保证底物有效性
✓ 质控菌株覆盖阳性与阴性反应参考菌株，包括奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及沙门氏菌、志贺氏菌等，并参照批次分析证书
技术参数
✓ 产品类型：鉴别培养基，用于微生物尿素酶活性检测
✓ 基础配方（g/L）：蛋白胨1.0；葡萄糖1.0；氯化钠5.0；磷酸二氢钾2.0；酚红0.012；琼脂15.0
✓ 终pH：6.8±0.2
✓ 配套补充液：尿素40%补充液；每升基础培养基无菌加入50ml，瓶装培养基每瓶加入10ml
✓ 脱水培养基配制：24.0g粉末悬浮于1L蒸馏水或去离子水中
✓ 灭菌条件：121°C高压灭菌15分钟，随后冷却至45-50°C
✓ 培养条件：37±1°C需氧培养，于6小时和24小时观察反应，必要时延长培养时间
✓ 有效期：管装培养基1年；瓶装培养基2年；脱水培养基4年；补充液2年
✓ 质控菌株（阳性）：奇异变形杆菌WDCM 00023（ATCC 29906；NCTC 11938），直接接种，18-24h/37±1°C，培养基转为粉红色
✓ 质控菌株（阴性）：肺炎克雷伯菌WDCM 00097（ATCC 13883）、大肠埃希菌WDCM 00013（ATCC 25922）、鼠伤寒沙门氏菌WDCM 00031（ATCC 14028）、肠炎沙门氏菌WDCM 00030（ATCC 13076）、宋内志贺菌WDCM 00127（ATCC 29930）、福氏志贺菌WDCM 00125（ATCC 29903），颜色无变化
✓ 外观：脱水培养基为自由流动、均匀的橙红色粉末；配制后培养基为澄清至微浑浊、橙色；补充液为澄清溶液
适用场景
✓ 临床微生物实验室：用于临床标本中尿素分解菌的分离与初步鉴定，辅助识别变形杆菌属、肠球菌以及隐球菌等尿素酶阳性酵母
✓ 食品与饲料微生物检验：在沙门氏菌、志贺氏菌、致病性肠炎耶尔森菌等检测流程中作为生化鉴定环节，用于尿素酶活性的鉴别
✓ 水质检验：依据ISO 19250等相关标准对水样中沙门氏菌进行检测时，用于菌株的尿素酶鉴别试验
✓ 药品、化妆品及环境样品微生物检验：用于分离菌株的属种鉴别与菌种确认工作
✓ 培养基质量控制与教学科研：按ISO 11133要求使用规定质控菌株开展性能测试，并用于微生物学教学中的生化反应演示
使用方法
✓ 脱水培养基配制：将24.0g粉末悬浮于1L蒸馏水或去离子水中，充分混匀，加热至充分溶解；121°C高压灭菌15分钟，冷却至45-50°C，无菌操作加入50ml尿素40%补充液，混匀后倾注于无菌终容器
✓ 瓶装培养基处理：在100°C水浴中融化瓶内培养基（瓶盖部分拧开），融化后拧紧瓶盖并翻转瓶身检查是否均匀，随后冷却至45-50°C；无菌操作加入10ml尿素40%补充液，混匀并避免产生泡沫，分装至无菌试管中
✓ 斜面制备与接种：将试管倾斜放置，使培养基凝固成斜面；取纯培养18-24小时的培养物制备浓菌液，沿斜面表面划线接种
✓ 培养：在37±1°C需氧条件下培养，稍松开管盖，分别于6小时和24小时观察反应，必要时延长培养时间
✓ 结果判读：培养基呈粉红色为阳性，表示存在尿素酶活性；颜色无变化、保持黄色至橙色为阴性；变形杆菌属通常在4-5小时内完成反应，部分致病性肠炎耶尔森菌菌株可能需要7天才出现阳性反应；尿素分解菌的终鉴定还需追加生化试验
美德声克里斯滕森尿素琼脂基础