美德声艰难梭菌琼脂基础培养基
产品概述
艰难梭菌琼脂基础培养基是一种用于从粪便标本中分离艰难梭菌的选择性培养基基础。艰难梭菌为革兰阳性厌氧芽孢杆菌，在肠道菌群失调时可大量繁殖并产生毒素，与抗生素相关性腹泻等肠道疾病相关。粪便标本中同时存在大量肠道杆菌、肠球菌和厌氧杂菌，直接分离目标菌难度较大，需要借助选择性培养基抑制伴随菌群，从而便于目标菌的分离与观察。
本品以脱水粉末形式提供，典型配方每升含特殊蛋白胨40.0g、磷酸氢二钠5.0g、磷酸二氢钾1.0g、硫酸镁0.1g、氯化钠2.0g、果糖6.0g和琼脂15.0g，25℃时pH为7.4±0.2。使用时按每500ml蒸馏水或去离子水加入34.6g粉末的比例配制，加热至沸腾使粉末充分溶解，经121℃、15分钟高压蒸汽灭菌，冷却至45～50℃后无菌加入艰难梭菌补充剂和脱纤维绵羊血，混匀后倾注平皿。
艰难梭菌补充剂每支含D-环丝氨酸125.0mg与头孢西丁4.0mg，适用于500ml培养基，加入后培养基中D-环丝氨酸浓度为250mg/l、头孢西丁浓度为8mg/l。这两种成分可抑制肠道杆菌、粪链球菌、厌氧非芽孢革兰阴性杆菌以及除艰难梭菌以外的梭菌属细菌。接种后在36±1℃厌氧条件下培养24～48小时，艰难梭菌可形成直径4～6mm、不规则、隆起、不透明、灰白色的菌落。
产品特点
✓ 基础培养基以脱水粉末形式提供，配方中含特殊蛋白胨40.0g/l与果糖6.0g/l，为目标菌生长提供氮源与碳源
✓ 配套艰难梭菌补充剂含D-环丝氨酸与头孢西丁两种抗菌成分，可抑制粪便标本中的多种伴随菌群
✓ 每支补充剂适用于500ml培养基，加入后培养基中D-环丝氨酸为250mg/l、头孢西丁为8mg/l
✓ 磷酸氢二钠与磷酸二氢钾构成缓冲体系，25℃时培养基pH为7.4±0.2，有利于目标菌生长
✓ 脱水培养基呈米色、自由流动且均一；配制后的培养基澄清，呈浅琥珀色
✓ 质量控制结果显示：大肠埃希菌ATCC25922不生长，艰难梭菌ATCC11204生长良好
✓ 支持粪便标本直接接种和酒精休克处理两种接种方式，便于按实验室条件选择使用
✓ 配制流程简便，每500ml培养基需称取34.6g粉末，灭菌冷却后加入补充剂与脱纤维绵羊血
技术参数
✓ 产品类型：选择性琼脂基础培养基（脱水粉末）
✓ 货号：620115/610115（基础培养基）；81007（艰难梭菌补充剂）；83296（脱纤维绵羊血）
✓ 典型配方（每升）：特殊蛋白胨40.0g；磷酸氢二钠5.0g；磷酸二氢钾1.0g；硫酸镁0.1g；氯化钠2.0g；果糖6.0g；琼脂15.0g
✓ pH（25℃）：7.4±0.2
✓ 配制比例：34.6g粉末/500ml蒸馏水或去离子水
✓ 补充剂（每支，适用于500ml）：D-环丝氨酸125.0mg（培养基中250mg/l）；头孢西丁4.0mg（培养基中8mg/l）
✓ 附加成分：脱纤维绵羊血25ml（货号83296）
✓ 灭菌与添加条件：121℃高压蒸汽灭菌15分钟；冷却至45～50℃后无菌添加补充剂与脱纤维绵羊血
✓ 培养条件：36±1℃，厌氧，24～48小时
✓ 菌落特征：直径4～6mm，不规则、隆起、不透明、灰白色
✓ 脱水培养基外观：自由流动、均一，米色
✓ 配制后培养基外观：澄清，浅琥珀色
✓ 质量控制：大肠埃希菌ATCC25922不生长；艰难梭菌ATCC11204生长良好
适用场景
✓ 临床微生物实验室从粪便标本中分离艰难梭菌，用于病原学培养检查
✓ 抗生素相关性腹泻等肠道疾病的粪便标本选择性分离培养
✓ 粪便标本直接接种，或经酒精休克处理后再接种的两种分离流程
✓ 医院感染监测、厌氧菌培养相关实验室的日常检测工作
✓ 教学与科研机构开展艰难梭菌分离培养方法及培养基评价实验
使用方法
✓ 称取34.6g粉末，悬浮于500ml蒸馏水或去离子水中
✓ 加热至沸腾并搅拌，使粉末充分溶解
✓ 于121℃高压蒸汽灭菌15分钟
✓ 冷却至45～50℃，无菌加入1支艰难梭菌补充剂（货号81007，D-环丝氨酸125mg、头孢西丁4mg）
✓ 无菌加入25ml脱纤维绵羊血（货号83296），充分混匀，使培养基中D-环丝氨酸为250mg/l、头孢西丁为8mg/l
✓ 将配制好的培养基倾注于平皿中备用
✓ 直接接种法：用粪便标本或初始悬液在培养基表面轻划涂布，以获得分离的单菌落
✓ 酒精休克处理法：将等体积无水乙醇或95%乙醇与粪便悬液混合，用涡旋混合器混匀，室温放置1小时后接种至培养基
✓ 置36±1℃厌氧环境培养24～48小时，观察并记录菌落形态
操作提示
✓ 补充剂与脱纤维绵羊血需在培养基冷却至45～50℃后无菌加入，加入后充分混匀再倾注平皿
✓ 培养过程需保持厌氧条件，培养温度为36±1℃，培养时间24～48小时
✓ 标本接种量不宜过大，接种时适当分散以获得分离良好的菌落，便于结果判读
产品清单
| 型号 | 产品名称 | 规格 |
|---|
| 620115/610115 | 艰难梭菌琼脂基础培养基 | 脱水粉末（基础培养基） |
| 81007 | 艰难梭菌补充剂 | 每支适用于500ml培养基，含D-环丝氨酸125.0mg、头孢西丁4.0mg |
| 83296 | 脱纤维绵羊血 | 25ml |
美德声艰难梭菌琼脂基础培养基