美德声铋葡萄糖甘氨酸酵母琼脂培养基
产品概述
比吉(尼克森)琼脂又称比吉琼脂,即铋葡萄糖甘氨酸酵母琼脂,是一种用于临床标本中念珠菌属检测与分离的选择性鉴别培养基。该培养基由尼克森研制,可依据菌落形态与色素产生情况对念珠菌进行区分,在部分菌种中还可观察到色素向菌落周围培养基扩散的现象。培养基中各成分分工明确:酵母浸出粉提供氨基酸、氮源、碳源、维生素与矿物质,支持微生物生长;甘氨酸起生长促进作用;葡萄糖作为可发酵碳水化合物提供碳源与能量。念珠菌通过底物还原过程产生硫化物,硫化物与铋结合后生成棕色至黑色的色素,使菌落呈现棕色至黑色,部分菌种的菌落周围还会形成深色沉淀带,据此可进行推测性鉴别。本产品用于体外诊断,作为诊断的辅助手段,需结合进一步试验才能完成诊断结果。其适用对象为经过培训、具备相应经验的实验室专业人员,用于对痰液、阴道标本、组织、皮肤刮取物等临床标本进行念珠菌的分离培养与初步鉴定。产品可提供脱水培养基、瓶装培养基、管装培养基与即用平板等形式。脱水培养基的配制方式为:将47.0g粉末悬浮于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸并频繁摇动至充分溶解,配制过程不需要高压灭菌。瓶装培养基则可在100°C水浴中融化,摇匀检查均匀性后冷却至45-50°C,混匀时避免产生泡沫,再无菌分装至平皿使用。
技术参数
✓ 产品类型:选择性鉴别培养基,用于体外诊断
✓ 终pH(25°C):6.8±0.2
✓ 酵母浸出粉:1.0g/L
✓ 柠檬酸铋铵:5.0g/L
✓ 亚硫酸钠:3.0g/L
✓ 葡萄糖:10.0g/L
✓ 甘氨酸:10.0g/L
✓ 琼脂:18.0g/L
✓ 配制浓度:47.0g/L,使用蒸馏水或去离子水
✓ 脱水培养基外观:自由流动、均匀、浅米色
✓ 制备后培养基外观:乳光、浅琥珀色
✓ 培养条件:22.5±2.5°C,有氧培养,平板倒置放置,培养时间可达5天
✓ 有效期:脱水培养基4年;瓶装培养基2年;管装培养基1年;即用平板6个月
质量控制
预期培养反应:
✓ 白色念珠菌 ATCC 10231:接种量50-100CFU,2-5d/22.5±2.5°C,生长良好(PR≥0.5),菌落棕色至黑色
✓ 热带念珠菌 ATCC 750:接种量50-100CFU,2-5d/22.5±2.5°C,生长良好(PR≥0.5),菌落棕色至黑色
✓ 酿酒酵母 ATCC 9763:接种量50-100CFU,2-5d/22.5±2.5°C,生长良好(PR≥0.5),菌落棕色至黑色
✓ 大肠埃希菌 ATCC 25922:接种量10⁴-10⁶CFU,2-5d/22.5±2.5°C,抑制
✓ 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923:接种量10⁴-10⁶CFU,2-5d/22.5±2.5°C,抑制
生产率比值(PR)为0.5相当于50%的回收率,具体结果请参考相应批次的检验报告(CoA)。
使用方法
✓ 使用前确认平板表面没有可见水分
✓ 将标本直接划线接种于琼脂表面,或从增菌培养物中取样涂布,以获得分布良好的单个菌落
✓ 接种后将平板倒置放置(琼脂面朝上),于22.5±2.5°C有氧培养,培养时间可达5天
✓ 培养结束后观察菌落颜色与形态,进行推测性鉴定,并按需开展进一步试验
✓ 脱水培养基配制:将47.0g粉末悬浮于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸并频繁摇动至充分溶解,不要高压灭菌
✓ 瓶装培养基处理:在100°C水浴中融化(松开瓶盖),旋紧瓶盖并摇匀检查均匀性,冷却至45-50°C,混匀时避免产生泡沫,无菌分装至平皿
✓ 标本宜在急性期、抗微生物治疗前(条件允许时)采集,采集后尽快送检,并按实验室规范完成采集、运输与保存
结果判读
✓ 白色念珠菌:光滑、圆形或半球形棕黑色菌落;无色素向周围培养基扩散;无金属光泽
✓ 热带念珠菌:光滑、分散、深棕至黑色菌落,可具黑色中心;轻微菌丝边缘;有金属光泽
✓ 克鲁斯念珠菌:大而扁平、皱褶的银棕黑色菌落,边缘呈棕色;可向培养基扩散黄色至棕色晕圈;有金属光泽
✓ 乳酒念珠菌:中等大小、扁平、深红棕色有光泽菌落;无扩散
注意事项
✓ 不要使用超过标签标示有效期的产品,产品出现污染迹象或任何变质表现时不要使用
✓ 本产品用于体外诊断,仅供实验室专业人员使用;操作人员须经过培训并具备相应经验,使用前请仔细阅读说明书
✓ 操作偏离说明书要求时,无法保证检测结果的可靠性;有关危害与安全操作信息请查阅安全数据表(SDS)
✓ 标本质量不佳、采集或运输不当、实验室处理不当以及检测技术本身的局限,均可能导致结果无效;由于营养差异,部分菌株可能生长不良或无法在该培养基上生长
✓ 本培养基用于感染性疾病诊断的辅助,需结合进一步试验完成诊断结果;鉴定试验宜在非选择性琼脂上进行
✓ 实验室设备应按实验室程序进行校准与维护;废弃物处理应符合现行与地方法规要求